这部电影在荒野的西部发现了猫和老鼠二人组，他们在那里帮助从一个恶棍手中拯救了一个牧场。竞争对手联手帮助一个女牛仔和她的兄弟从贪婪的土地掠夺者手中拯救他们的家园。杰瑞的三个早熟的侄子也加入了行动，汤姆围捕了一队土拨鼠。

丰富的知识、充满魅惑的舞会、以及帅气的鼓手史蒂芬（凯姆•吉甘戴Cam Gigandet 饰）让刚迈进大学校门的女孩子莎拉（敏卡•凯莉 Minka Kelly 饰）兴奋不已，而友善的室友蕾贝卡（莉顿•梅斯特 Leighton Meester 饰）则让她的大学生活显得更加完美。然而，生活并不像表面那样平静，蕾贝卡乖戾的性格渐渐显露，她不仅恐吓与莎拉亲近的好友崔西（艾莉•米夏卡Alyson Michalka 饰）远离莎拉，而且因为莎拉要搬走，残忍的杀死了莎拉的宠物猫。蕾贝卡怪异的占有欲让莎拉感到恐惧，她终于忍受不了自己的病态室友，决定远离这一切，然而事情并没有那么简单……

迪恩（简森·阿克斯 Jensen Ackles 饰）和萨姆（贾德·帕达里克 Jared Padalecki 饰）终于找到父亲约翰（杰弗瑞·迪恩·摩根 Jeffrey Dean Morgan 饰），但为了救迪恩，约翰甘愿深入地狱，留下兄弟两个继续完成“猎人”职责。同时兄弟俩也了解到“黄眼恶魔”的存在，开始一路追踪这个最大仇人。二人解决了一个又一个超自然生物，兄弟二人的性格、理想分歧也一直存在，不时吵吵闹闹。但萨姆终究是黄眼恶魔的唯一目标，为了萨姆可以好好活下去，迪恩不惜和恶魔做交易，用自己的灵魂换回萨姆的生命……